植物生理生化实验原理和技术(面向21世纪课程教材)

本书全面地介绍了植物生理生化实验原理及其技术。全书分为两篇。第一篇为实验原理，着重介绍离心技术、层析技术、电泳技术、红外线二氧化碳气体分析技术、光学分析技术、气体测压技术、电化学分析技术、免疫化学技术，并新增加了光合作用测定系统、蛋白质双向电泳、毛细管色谱技术等较新的分析理论和技术，同时新增一章“Southern blotting和PCR反应原理”的内容。第二篇为实验技术，共选编63个实验，除修订上一版内容外，引入“TPS-1光合作用系统测定光合速率、呼吸速率和蒸腾速率”、PCR实验过程中的PCR仪、“凝胶成像系统”等技术和设

本次修订的原则基本是保持原有的编写体系，即第一篇实验理论部分，对原来的有关实验技术的一般原理、离心技术、层析技术、电泳技术、红外线气体分析技术、光学分析技术、气体测压技术、电化学分析技术、免疫化学技术等章节内容进行了更新和适当增减，此次新增加了“Southern blotting和PCR反应原理”一章；第二篇为实验技术部分，收录和新编了包括生物化学和植物生理学在内、涉及60多项常用的实验技术，同一测定内容的多项实验技术并列列出并进行了适当比较，便于使用者在面对复杂的实验材料时选用合适的实验方法。此外，在此次修订中新增了综合性实验内容，便于实验设施较好的院校在加强学生综合实验技能培养的教学过程中参考使用。

第一篇 植物生理生化实验原理
第一章 植物生理生化实验技术的一般原理
1.1植物材料的种类
1.2植物材料的采取
1.3分析样品的前处理和保存
1.4待测组分的提取、分离和纯化技术
1.5样品中待测组分的测定
1.6实验结果的数据处理与分析
第二章 离心技术
2.1基本原理
2.2离心机的类型及主要构造
2.3常用离心技术
2.4分析性超速离心技术的应用
第三章 层析技术
3.1层析原理
3.2分配层析
3.3吸附层析
3.4凝胶层析
3.5离子交换层析
3.6亲和层析
3.7气相色谱
3.8高压液相色谱
3.9毛细管电泳色谱
3.10层析技术的应用实例
第四章 电泳技术
4.1电泳基本原理
4.2影响迁移率的主要因素
4.3凝胶电泳
4.4电泳的应用
第五章 红外线CO2气体分析技术
5.1红外线CO2气体分析仪的工作原理
5.2红外线C02气体分析仪的类型
5.3红外线CO2气体分析技术的应用
第六章 光学分析技术
6.1紫外光一可见光分光光度法
6.2原子吸收分光光度法
6.3火焰分光光度法
6.4荧光分光光度法
6.5旋光分析法
第七章 气体测压技术
7.1气体测压技术的类型及基本原理
7.2气体测压技术的应用
第八章 电化学分析技术
8.1电化学分析技术的类型及基本原理
8.2电化学分析技术的应用
8.3DDs_12A型数字式电导率仪的
基本原理及使用方法
第九章 免疫化学技术——酶联免疫吸附测定(ELISA)
9.1ELISA的原理
9.2设计和合成特定的免疫原
9.3抗体的制备
9.4标记抗原的制备
9.5ELISA测定程序的设计
9.6总结
第十章 Southernblotting和PcR反应原理与技术
10.1Southern杂交
10.2PCR反应
第二篇 植物生理生化实验技术
实验1植物组织中自由水和束缚水含量的测定
实验2植物组织水势的测定
I小液流法
Ⅱ折光仪法
Ⅲ压力室法
实验3植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)
实验4钾离子对气孔开度的影响
实验5植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定
实验6根系活力的测定(TTC法)
实验7植物组织中金属元素的测定(原子吸收分光光度法)
实验8植物体内硝态氮含量的测定
实验9植物体内硝酸还原酶活力的测定
I离体法
Ⅱ活体法
实验10用真空渗入法测定环境因子对光合作用的影响
实验11叶绿体色素的提取、分离和理化性质
I提取与分离
Ⅱ理化性质
实验12叶绿素含量的测定
实验13希尔反应的观察
实验14核酮糖一1，5一二磷酸羧化酶活性的测定
I分光光度法
Ⅱ同位素法
实验15乙醇酸氧化酶活性的测定
实验16红外线CO2气体分析仪法测定植物光合速率与呼吸速率
I密闭系统斜率法
Ⅱ密闭系统落差法
实验17TPs一1便携式光合作用系统测定光合速率、呼吸速率和蒸腾速率
实验18氧电极法测定光合速率和呼吸速率
实验19叶绿体光诱导荧光强度的测定
实验20叶绿体中甘油醛一3一磷酸脱氢酶活性的测定
实验21微量定容测压法测定种子的呼吸速率
实验22小篮子法(广口瓶法)测定植物的呼吸速率
实验23愈创木酚法测定过氧化物酶活性
实验24过氧化氢酶活性测定
I紫外吸收法
Ⅱ高锰酸钾滴定法
实验25氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶活力
实验26淀粉酶活性的测定
实验27脲酶K值的测定
实验28植物过氧化物酶同工酶测定(圆盘式凝胶电泳法)
实验29蛋白质相对分子质量的测定(SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法)
实验30植物组织中蛋白质含量的测定
I双缩脲法
ⅡFolin一酚试剂法
Ⅲ考马斯亮蓝G一250法(Bradford法)
Ⅳ紫外吸收法
实验31植物组织中总氮含量的测定——微量凯氏定氮法
实验32植物组织中游离氨基酸总量的测定——茚三酮试剂显色法
实验33植物组织中糖含量的测定
I蒽酮比色法测定可溶性糖
Ⅱ3，5一二硝基水杨酸测定还原糖
Ⅲ苯酚法测定可溶性糖
Ⅳ斐林试剂比色法测定还原糖
实验34谷物淀粉含量的测定(旋光法)
方法I
方法Ⅱ
实验35谷物种子蛋白质组分的分析
实验36植物种子生命力的快速测定
ITTC法
Ⅱ染料染色法
Ⅲ碘化钾反应法
Ⅳ荧光法
实验37花粉活力的测定
I碘一碘化钾(I—KI)染色测定法
Ⅱ过氧化物酶测定法
Ⅲ氯化三苯基四氮唑法(TTC法)
实验38植物组织中纤维素含量的测定
实验39苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定
实验40植物组织中DNA的提取与测定
实验41DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验42RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验43PCR反应
实验44Sotlthemblotting
实验45植物组织ATP酶活性测定
实验46种子粗脂肪含量的测定
实验47气相色谱法测定植物样品膜脂中脂肪酸的含量
实验48植物种子中主要不饱和脂肪酸的分离(反相纸层析法)
实验49油菜籽中硫代葡萄糖苷总量的测定
I内源酶法
Ⅱ葡萄糖试纸法(硫苷总量的快速测定)
实验50气相色谱法测定乙烯含量
实验51酶联免疫吸附检测法(ELISA)测定植物激素含量
实验52植物体内脱落酸、赤霉素的分离和测定
实验53赤霉素对a一淀粉酶的诱导形成
实验54植物激素对愈伤组织的形成和分化的影响
实验55类似生长素对种子萌发的影响
实验56植物春化和光周期现象的观察
I植物春化现象的观察
Ⅱ植物光周期现象的观察
实验57抗坏血酸(维生素c)的测定
I滴定法
Ⅱ比色法
实验58谷类作物种子中赖氨酸含量的测定
I茚三酮显色法
Ⅱ染料结合法(DBL)
实验59脯氨酸含量的测定
实验60植物组织中丙二醛含量的测定
实验61植物抗逆性的鉴定(电导仪法)
实验62综合实验1一大豆为材料
实验63综合实验2一甜叶菊叶片为材料
附录
附录1硫酸铵饱和度常用表
附录2实验中常用酸碱的相对密度和浓度的关系
附录3常用固态酸、碱、盐的摩尔浓度配制参考表
附录4常用酸碱指示剂
附录5常用缓冲溶液的配制
主要参考文献
附录6植物组织培养常用培养基
附录7常用计量单位
附录8常见的植物生长调节物质及其主要性质
附录9植物激素与生长调节剂在农业生产中的应用